实验分析定氮仪的校准方法

　定氮仪已被广泛应用于粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、土壤、水、药物、沉淀物和化学品等中的氨氮、蛋白质氮含量等的检测，尤其是奶制品“三聚氰胺"事件发生以后，氮含量的检测越来越重要，它已成为粮食、饮料、奶乳液、饲料等检验部门进行监测分析的必需仪器，但由于目前国内尚无针对此类仪器的检定规程或校准规范，给其计量校准带来了困难，也使得各检测机构与使用部门校验定氮仪时的校准项目和校准方法各不相同。为保证定氮仪的分析结果准确可靠，满足客户的校准需求，通过参考国内外相关标准并结合仪器原理及实际使用要求，提出一种校准该仪器的可行方法。

　　1 定氮仪的工作原理及结构

　　定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理，通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。因其蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法，故又被称为凯氏定氮仪。

　　根据凯氏定氮原理测定氮需要三个步骤，即消解、蒸馏和滴定。凯氏定氮仪的工作原理是将样品与硫酸和催化剂一同加热消化，使样品分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量按含氮量 -粗蛋白质含量公式计算氮含量。

　　定氮仪通常主要由蒸馏装置、滴定装置、检测装置和排废装置组成。

　　2 定氮仪的性能要求

　　根据定氮仪的基本性能和用途

　　3 定氮仪的操作步骤

　　3. 1 称量称取0. 1g（ 准确至0. 0001g） 氯化铵或硫酸铵标准物质，置于定氮瓶消化管中，残留在容器中的氯化铵或硫酸铵标准物质可以用去离子水洗入管中。

　　3. 2 消化在消化管中加入 6g 硫酸钾和 0. 2g 硫酸铜，量取 12 ~15mL 浓硫酸，徐徐加入到消化管中，混合后置于定氮仪已经预热的模块中。接通冷凝水，打开抽气泵，逐渐增加温度防止有泡沫冲出。当烧瓶内容物的颜色逐渐变成透明的淡绿色时，继续消化0. 5 ~ 1h.

　　3. 3 转移将消化好的样品冷却，沿瓶壁吹入少许水，水迸出转入 100mL 容量瓶中，以水冲洗消化管多次，至容量瓶内液体的体积约 100mL,冷却后定容、摇匀。

　　3. 4 蒸馏接好定氮装置，加入数粒玻璃珠防止暴沸，加热煮沸水蒸汽发生瓶内的水，接通冷凝水。在接收瓶中加入 50. 0mL 硼酸溶液（ 20g/L） 和 3 滴甲基红 -溴甲酚绿混合指示剂，使冷凝器的出液端口位于接收瓶液面以下。将 10 ~20mL 消化液小心移入定氮器的蒸馏瓶中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，再缓慢加入 10mL 氢氧化钠溶液（ 400g/L） ,通入蒸汽进行蒸馏。蒸馏 4min 后，稍移动接收瓶，使出液口位于液面之上，流出的蒸馏液沿瓶壁4 校准项目和校准方法4. 1 空白示值仪器开机，预热 10min,按操作步骤进行，除不加氯化铵或硫酸铵标准物质外，其它过程和样品的测量相同。连续测量 5 次，每次测量所消耗的酸标准溶液的体积与前一次测量所消耗的酸标准溶液的体积之差作为空白示值。

　　4 校准项目和校准方法

　　4. 1 空白示值

　　仪器开机，预热 10min,按操作步骤进行，除不加氯化铵或硫酸铵标准物质外，其它过程和样品的测量相同。连续测量 5 次，每次测量所消耗的酸标准溶液的体积与前一次测量所消耗的酸标准溶液的体积之差作为空白示值。

　　4. 2 回收率 准确称量硫酸铵或者氯化铵标准物质 0. 1g（ 准确到 0. 0001mg） ,按照操作步骤进行测量，根据式（ 1） 计算标准物质的氮含量，重复测量 3 次，取 3次测量的平均值作为氮含量测量结果 3 定氮仪的操作步骤3. 1 称量称取0. 1g（ 准确至0. 0001g） 氯化铵或硫酸铵标准物质，置于定氮瓶消化管中，残留在容器中的氯化铵或硫酸铵标准物质可以用去离子水洗入管中。

　　5 结论

　　本文提出的定氮仪的校准项目和校准方法，经试验验证可以满足定氮仪的使用要求，只要这三项校准项目的校准结果能够满足仪器的性能要求，即可认为该仪器性能正常，其测量结果准确可靠。因此，可以依据此方法对定氮仪进行计量校准。