高速微量离心机与超速离心机的离心方法 什么是高速微量离心机? 高速微量离心机特别适用于高速微滤。一般转速为16000r/min,容量较小。采用微型无刷直流电机,升降速度快,无灰尘,无灰尘。维持。电子门锁安全可靠。微电脑控制,外形采用*化钢结构,精致美观,数字显示,RCF离心力开关显示,编程操作,使用方便。 超速离心机的离心方法 离心分离生物大分子和亚细胞物质的基本原理是它们在液体介质中根据不同的沉降速度,或不同的密度形成不同的区域,并在液体介质中的不同位置将它们一一分离。前者是沉降速度法。使用这种方法时,液体介质的最大密度小于样品中最小颗粒的密度。离心速度快,时间短;后者是沉降平衡法,液体介质的最大密度为 大密度大于样品中最小颗粒的密度,离心应采用较低的速度和较长的时间。实际操作有几种形式: 差速离心 这种方法是选择不同速度的离心来分离不同的成分。例如,大颗粒和上清液先低速沉降,中颗粒在高速离心后沉降在上清液中,小颗粒在超速离心后沉降在上清液中。通过逐步增加离心力来分离上层流体,从而分离出不同大小的颗粒。这种方法比较简单方便。分离的组分沉入管底,因此您可以快速浓缩所需组分并减少体积。但是,回收率和纯度之间存在矛盾。为了提高回收率,需要提高离心速度或延长离心时间,使大小相近的颗粒也沉到管底。因此,该方法多用于样品的粗提纯或初步浓缩。 速度区(或速度梯度)离心 在该方法中,样品被放置在连续密度梯度液体上。通过离心,大颗粒快速沉降,小颗粒缓慢沉降。一段时间后,相同的粒子在相同的深度形成一条带,从而将各种成分分开。适用于分离密度相同但尺寸不同的物质。例如,不同的蛋白质成分具有相似的密度但具有不同的分子量。这种方法很容易将它们分开。但是,要分离密度不同、大小相近的物质并不容易。蔗糖梯度是一种常用的培养基。使用不同浓度的蔗糖溶液(5%-60%)形成梯度进行梯度分离心。然后分别收集不同区域的组件。 沉降平衡离心 这是一个静态方法。在离心管中形成液体梯度。在离心过程中,每个组分以不同的速度下沉,但最终保持与自身相同的密度,形成一个狭窄的平衡区并保持相对稳定。为了使样品的所有成分达到其平衡位置,需要长时间离心。该方法适用于分离大小相近但密度不同的物质,如核酸的分离。氯化铯梯度是平衡离心中常用的介质。它具有高分辨率,可以区分密度差为0.05的成分。但是离心时间要十几到几十个小时,而且价格很贵。已经有一种名为“Percoll"的 Ficoll 溶液可以替代氯化铯梯度。介质可快速形成梯度,使离心时间大大缩短至1-2h,同时仍具有良好的分离效果。并且有匹配的标记珠(Densitymarkerbeads)来确定样品的密度。 |